产品货号：
SK088-2
中文名称：
羟脯氨酸(HYP)测试盒(可见分光光度法)
英文名称：
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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测定意义
测定原理
保存：2～8℃，避光，有效期3个月。
天平、烘箱、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、无水乙醇、异丙醇、6mol/L盐酸和蒸馏水。
V反总：反应总体积，1mL；
V样：反应中样品体积，0.2mL；
V样总：加入提取液体积，mL；
W：样品质量，g；
2：血清吹干后复溶的倍数。
相关搜索：羟脯氨酸(HYP)测试盒(可见分光光度法)，组织羟脯氨酸检测，细胞羟脯氨酸检测，血清羟脯氨酸检测
HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
测定原理
样品经酸水解产生游离的HYP，进一步被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。
| 组分 | 规格 |
| 细胞提取液 | 100mL |
| 试剂一 | 10mL |
| 试剂二 | 10mL |
保存：2～8℃，避光，有效期3个月。
天平、烘箱、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、无水乙醇、异丙醇、6mol/L盐酸和蒸馏水。
- 组织样本：称取约0.5g样品于玻璃管，加入5mL的组织提取液，置于110℃烘箱，水解6至12小时，用提取液定容至5mL，12000g，25℃，离心20min，取上清待测。
- 细胞样本：取500万个细胞，加入2mL的细胞提取液，于高压消毒器中15磅保持30min，自然降压后待测。
- 血清样本：取0.2mL血清，加入1mL无水乙醇使蛋白质沉淀，8000g 4℃离心5min。将上清倒入另一个EP管，氮吹或沸水浴将乙醇挥发干。冷却后再加入0.4mL 50%异丙醇，充分溶解混匀待测。
- 按下表加入各成分配制反应体系：
成分 空白管 测定管 样本 - 200 试剂一 200 200 混匀，室温静置20min。 试剂二 200 200 水 600 400 - 混匀，60℃，20min，取出后25℃静置15min，蒸馏水调零，1mL玻璃比色皿中检测560nm处吸光值。ΔA=A测定-A对照。
- OD值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
- 试剂有一定的毒性，请操作时做好防护措施，防止吸入或与皮肤接触。
- 最低检出限为3.8mg/L。
标准曲线：y=64.875x+ 0.0251，R2=0.9991
- 按组织计算
HYP含量(mg/g鲜重)=(ΔA -0.0251)÷64.875×V反总÷(V样÷V样总×W) = 0.385×(ΔA -0.0251)÷W - 按细胞计算
HYP含量(mg/104cell)=(ΔA -0.0251)÷64.875×V反总÷V样×V样总÷细胞数量(万个) = 0.154×(ΔA -0.0251)÷细胞数量(万个) - 按液体体积计算
HYP含量(mg/mL)=(ΔA -0.0251)÷64.875×V反总÷V 样×2 = 0.154×(ΔA -0.0251)
V反总：反应总体积，1mL；
V样：反应中样品体积，0.2mL；
V样总：加入提取液体积，mL；
W：样品质量，g；
2：血清吹干后复溶的倍数。
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